離子對試劑規(guī)范的選用步驟
離子對試劑主要是作用于樣品和固定相之間的一種物質(zhì)，所以在選擇離子對試劑時，要考慮色譜柱的填料和樣品的酸堿性。
離子對試劑的種類和濃度對分離效果都有較大的影響.離子對試劑種類的選擇依賴于被分離樣品的性質(zhì).被分離溶質(zhì)是強(qiáng)酸或強(qiáng)堿,離子對試劑可以是強(qiáng)酸或強(qiáng)堿,弱堿或強(qiáng)酸,弱酸,如被分離的溶質(zhì)是弱酸或弱堿,則選用的離子對試劑必須是強(qiáng)堿或強(qiáng)酸.對于溶質(zhì)結(jié)構(gòu)性質(zhì)相差較大的混合樣品,離子對試劑種類的選擇并沒有特殊要求.離子對試劑疏水性的差別可以通過調(diào)節(jié)離子對試劑濃度和有機(jī)溶劑濃度獲得滿意的分離效果。離子對試劑用于高壓液相離子對萃取的液相色譜法分離分析強(qiáng)極性有機(jī)酸和有機(jī)堿的好方法。離子對試劑廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)，藥物學(xué)，和石油化工等領(lǐng)域。
離子對試劑選用步驟
1.選擇一根適合的色譜柱，常為C18柱；
2.準(zhǔn)備流動相時僅使用HPLC級別的水和色譜級試劑；
3.選擇能給出*分離度的流動相成分和濃度；
4.如果樣品中有非離子化物質(zhì)，在嘗試離子化分離之前首先優(yōu)化分離情況；
5.選擇合適的離子對系列試劑以提供相應(yīng)的離子配對：對于酸性分析物使用酸性離子對試劑；對于堿性分析物使用堿性離子對試劑；
6.通過比較選擇所得分離度的離子對試劑；
7.一旦離子對試劑已經(jīng)確定，調(diào)節(jié)流動相的pH值將分離度zui大化；因為微小的pH值改變對保留性質(zhì)和選擇性都有較大的影響，所以仔細(xì)小心的小幅度調(diào)節(jié)pH值；
8.理想狀況下，流動相中的離子對試劑濃度應(yīng)為0.005M，但是稍微增加離子對試劑可能會稍微增加保留性質(zhì)并因此優(yōu)化分離情況。
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